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平末端DNA加A試劑盒 T4原理載體及其他

  • 型   號:42016
  • 價   格:
  • 更新時間:2025-04-24
  • 廠家性質:經銷商

由Pfu、HiFi、Vent或KOD等有3’→5’外切酶活性的高保真DNA聚合酶擴增的PCR產物為不帶A尾的平末端DNA片段,如該平末端DNA片段需要和T載體相連接,需要先利用Taq DNA polymerase在平末端片段后加上A尾后才能與T載體的T頭互補連接。本試劑盒提供了加A尾需要的所有成分,可以在20分鐘左右完成整個過程。
平末端DNA加A試劑盒 T4原理載體及其他

平末端DNA加A試劑盒


平末端DNA加A試劑盒 T4原理載體及其他

目錄號:42016

試劑盒組成、儲存、穩定性:

組成

25次(42016-25)

50次(42016-50)

Taq DNA polymerase

25ml

50ml

10 x A-tailing buffer

25ml

50ml

dATP Mix

25ml

50ml

儲存:-20 ℃ 保存。

產品介紹:

Pfu、HiFi、Vent或KOD等有3’→5’外切酶活性的高保真DNA聚合酶擴增的PCR產物為不帶A尾的平末端DNA片段,如該平末端DNA片段需要和T載體相連接,需要先利用Taq DNA polymerase在平末端片段后加上A尾后才能與T載體的T頭互補連接。本試劑盒提供了加A尾需要的所有成分,可以在20分鐘左右完成整個過程。

操作步驟:

1.    平末端PCR產物用PCR清潔(無非特異擴增)或者膠回收純化(有非特異擴增)。

2.    純化好的平末端DNA片段按以下反應體系加A尾:

平末端DNA片段

1-7ml(不超過1mg)

dATP Mix

1ml

10 x A-tailing buffer

1ml

Taq DNA polymerase

1ml

3.   輕輕混勻后72℃保溫20-30 分鐘。

4.    加A尾的產物可以不需要再次清潔或者膠回收純化,取1-2ml直接用于連接反應。

 平末端DNA加A試劑盒 T4原理載體及其他


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